로사 26 노크인 마우스의 유용성

로사 26 노크인이란?

로사 26 노크 인

마우스 게놈의 로사 26 궤적은 연구자들이 관심있는 유전자를 표현할 수있는”안전한 항구”입니다. 다른 유전자 표적화 기술(배아 줄기 세포;크리스퍼)은 로사 26 궤적에서 특정 유전자 삽입을 만드는 데 사용됩니다. 과학자들이 로사 26 을 사용하는 이유와 이러한 유형의 마우스 유전자 모델을 사용하는 다른 주요 이점에 대해 논의 할 것입니다.

로사 26 궤적이란?

1990 년대 초,연구자들은 로사 26 을 분리하여 과학자들이 연구 할 유전자를 삽입 할 수있는 특정 부위를 제공했습니다. 이 전에 유전 학자들은 유전자 변형 마우스 모델을 사용하여 가설을 테스트했습니다. 유전자 변형 마우스는 전핵 내에 플라스미드를 주입하여 생성됩니다. 유전자 변형의 한 가지 한계는 플라스미드 유전자가 무작위로 마우스 게놈에 통합된다는 것입니다.

이 궤적은 생쥐의 6 번 염색체에서 발견된다. 그것은 몸 전체와 그것을 표현하는 신체의 모든 세포/조직을 복제하는 중요하지 않은 아르 자형 유전자를 인코딩합니다. 그러므로,이 궤적은 유전자 삽입을 만들고 단백질이 몸 전체에 어떻게 충격을 가하는지 공부하기를 유용한 장소를 제공합니다.

과학자들은 처음에 배아 줄기 세포 레트로 바이러스 유전자 포획을 통해이 라인을 만들었습니다. 과학자들은 이것을 프로 바이러스 사본으로 포함하는 배아 줄기 세포를 확인하고 배반포에 주입했습니다. 연구진은 향후 연구를 위해 로사 26 삽입을 한 쥐를 분리했다. 어떤 세포는 처음부터 필요한 사람을 만들기 위해 과학자를 필요로하는,기본적으로 유전자 로사 지오 벡터를 가지고 있지 않았다.

유전자 표적화 이전에,연구자들은 유전자 변형 마우스를 만들었다. 이것은 플라스미드—트랜스젠을 마우스 전핵 내로 주입함으로써 달성되었다. 이 방법의 한 가지 단점은 트랜스 젠이 마우스 게놈에 무작위로 통합된다는 것입니다. 대조적으로,유전자 타겟팅은 과학자들이 관심있는 유전자를”녹아웃”하거나 마우스 게놈의 특정 부위에 삽입을 할 수있게합니다. 로사 26 궤적은 유전자를 삽입하는 데 유용한 장소이며,삽입 위치는 무작위가 아니라 알려져 있으며 과학자들이 다른 유전자의 기능에 영향을 미치지 않고 유전자를 연구 할 수 있습니다.

이 궤적을 사용하는 노크 인 모델은 결과의 정확성과 재현성을 향상시킵니다. 전통적으로 이러한 노크 인 마우스는 마우스 배아 줄기 세포를 사용하여 생성되었으며,이 과정은 크리스퍼 기술의 출현으로 더욱 효율적이되었습니다. 바이오사이토젠은 상동 재조합을 10~20 배 증가시킴으로써 보다 빠른 결과를 얻기 위해 독자적인 크리스퍼/카스 9 기반의 익스 트림 게놈 편집 시스템을 사용합니다.

로사 26 이 사용되는 이유는 무엇입니까?

유전자에 노크가 용이하기 때문에 마우스 염색체 6 의 로사 26 궤적은 과학자들에게 매우 유용하다. 이 궤적은 중요하지 않은 아르 자형 유전자 그리고 중요한 기능을 제공하는 유전자가 아닌 삽입은 부작용이 없습니다. 이 사이트의 안정적인 특성과 과학자들이 글로벌 또는 조건부 유전자 발현을 제어 할 수있는 능력은 로사 26 마우스 모델을 다양한 유전 도구로 만듭니다.

셀 계통 연구

셀 계통 연구

연구 세포 계통

이 부위에 리포터 유전자를 추가하여 연구자들은 세포 계통을 추적 할 수 있습니다. 라인을 통해 유전자를 따라 할 수있는 능력은 유전자 코드가 아래로 전달하고 세대에 걸쳐 자신을 표현하는 방법에 대한보다 심층적 인 연구를 할 수 있습니다.

리포터를 독소로 대체하면 과학자들은 세포 계통을 제거 할 수 있습니다. 유전자를 두드리는 것은 특정 유전자의 부재가 유기체에 어떻게 영향을 미치는지 연구하는 데 사용되는 한 가지 방법입니다. 이러한 연구는 그 부재를 통해 유전자 기능을 식별하는 데 특히 유용해진다.

몸 전체의 유전자 발현 연구

로사 26 부위에 삽입된 유전자의 높은 발현 수준은 연구자들에게 바람직하게 만든다. 로사 지오 레트로 바이러스에 감염된 배아 줄기 세포에서 자란 쥐의 1997 년 연구는 신체의 모든 조직에 걸쳐 발현을 보여 주었다.

키메라 분석

키메라 분석은 로사 26 마우스의 또 다른 응용이다. 이러한 연구는 세포에서 다른 유전자형을 가진 동물을 만드는 두 개의 접합체에서 마우스를 검사합니다. 몇몇 동물은 그들의 모피 본 세포에 있는 그 다른 유전자형의 표정을 보여줍니다.

로사 26 마우스는 세포 전체에 걸쳐 제 2-갈락토시다아제를 발현한다. 따라서 과학자들은 로사 26 세포를 표시된 야생 대립 유전자로 사용할 수 있습니다. 이 세포를 돌연변이 세포와 교차 시키면 변경된 세포가 표시됩니다. 로사 26 사이트의 이러한 마커는 키메라 내에서 다른 유전자형을 나타낼 수 있습니다.

노크 인

에서 유래 한 동형 접합체 연구 유전자형이 결합 된 마우스는 연구에 유용하지만 로사 26 부위의 유전자를 노킹 한 단일 유전자형을 가진 마우스도 유익합니다. 이 궤적을 사용한 실험에서 생산 된 동형 접합체는 수는 적지 만 살아 있습니다. 이 생쥐의 생존 능력은 로사 26 위치에서 추가 된 유전자의 결과를 더 오래 연구 할 수있게합니다.

배아 세포 분화 검사

로사 26 사이트를 사용하여 과학자들은 단백질 키나아제를 포함하는 안정한 세포주를 만들었다. 세포가 과발현되었을 때,그들은 더 큰 분화와 혈관 형성을 가졌다. 연구진은 로사 26 사이트에 표적 유전자를 삽입하면 배아 세포가 특정 신체 세포로 어떻게 변하는 지 더 잘 연구 할 수 있다고 가정했다.

질병에 대한 유전자의 영향 조사

질병에 대한 유전자의 영향 조사

유전자가 질병에 미치는 영향 조사

과학자들이 로사 26 노크-인 연구를 수행하는 한 가지 이유는 유전자가 질병의 발병에 어떻게 영향을 미치는지 알아보기 위해서입니다. 몇몇 질병들은 유전적 연관성을 의심하고 있으며,게놈에서 이들 유전자를 더하거나 빼면 개별 유전자 또는 그 그룹이 당뇨병이나 알츠하이머 병과 같은 상태의 발달에 역할을 하는지를 결정할 수 있습니다.예를 들어,연구자들은 로사 26 노크 인 마우스를 사용하여 근 위축성 측삭 경화증의 발병에 어떤 영향을 주 었는지 조사했습니다. 이 연구는 생쥐에서 충족 된 루틴을 증가시키는 것이 운동 뉴런 발달에 영향을 미치지 않는다는 것을 발견했다. 그러나,그것은 운동 신경 세포의 손실을 느리게 않았다,루게릭 병 발병 지연 및 루게릭 병 마우스의 수명을 연장.

다양한 종에서의 위치 연구

이 궤적의 또 다른 유용한 측면은 다른 종에서의 존재이다. 로사 26 궤적은 원래 생쥐에서 특징 지어졌지만 인간,돼지,쥐,생쥐 및 토끼에도 존재합니다. 2018 년에 연구자들은 소의 로사 26 사이트를 성공적으로 확인했습니다. 로사 26 이 소의 안전한 항구로서의 효능을 증명하기 위해 연구자들은 유전자를 이 장소에 삽입하고 향후 연구에 사용할 세포주를 만들었다.

인간에서의 로사 26 궤적 연구

생쥐에서의 유전자 삽입 연구는 미래의 인간 유전학 연구에 도움이 될 수 있지만,인간에서의 로사 26 의 사용은 아직 가능하지 않다. 생쥐의 위치와 달리 인간의 로사 26 은 중요한 유전자에 가깝습니다. 따라서 인간의 로사 26 궤적을 편집하는 유전자는 이러한 다른 유전자의 기능을 방해 할 수 있습니다. 인간에서 이 위치에 유전자를 추가하기의 충격이 불명한 충격을 있을 수 있었기 때문에,로사 26 는 인간에 있는 안전한 항구 삽입 사이트가 아닐 수도 있습니다. 그러나,에이브스 1 은 인간 게놈의 안전한 항구 궤적이다.

로사 26 노크인 마우스의 추가 이점

로사 26 궤적은 게놈의 다른 위치에 비해 몇 가지 이점을 제공하여,부위별 유전자 삽입에 이상적인 선택이다.

더 적은 쥐 필요

과학자들은 유전자 삽입을위한 특정 부위를 알고 있기 때문에 성공을 위해 더 적은 쥐를 필요로합니다. 적은 수의 마우스에 대한 필요성은 다른 분야에서 더 많은 연구를 허용,필요한 자원과 시간을 줄일 수 있습니다.

높은 성공률

유전자 변형 마우스에서 유전자는 무작위로 게놈에 통합 하 고 유전자 복사 수는 변수. 로사 26 궤적을 표적으로 할 때,과학자들은 알려진 위치 때문에 더 높은 성공률과 오래된 트랜스젠더 기술에 비해 결과의 더 큰 예측 가능성을 달성합니다.

안정된 위치

일부 위치는 중요한 기능을 가진 단백질을 암호화하기 때문에 마우스 게놈의 어느 위치에서도 유전 적 삽입을 할 수 없습니다. 대조적으로,로사 26 궤적은 유전자 기능을 방해하지 않는 안전한 항구입니다. 따라서 로사 26 궤적에 돌연변이 또는 형광 기자가있는 유전자를 삽입하면 새로운 유전자가 간섭없이 표현 될 수 있습니다.

결과의 재현성

유전자 변형 모델이 생성 될 때 다수의 설립자 마우스가 생성된다. 이 설립자는하지만,다른 유전 적 결과를 가지고 있었고,그들은 재현 거의 불가능했다. 이 문제의 일부는 각 모델의 형질 복사본 번호 및 위치 차이와 관련이 있습니다. 로사 26 의 경우,과학자들은 그들과 다른 연구자들이 실험 결과를 재현 할 수있는 뚜렷한 궤적을 가지고 있습니다.

세포 분화 후 표적형성 유전자

세포 분화 후 표적형성 유전자

세포 분화 후 표적유전자 발현

결국,배아 세포는 조직,혈액,장기,뼈 및 기타 신체 부위를 형성하는 다양한 신체 세포로 분화 될 것이다. 로사 26 부위를 사용하고 표적 유전자를 삽입하는 경우,이 분화 사건 후에 유전자의 결과 발현이 세포에 나타난다.

이 광범위한 표현은 이러한 유전자 편집 방법의 성인 마우스조차도 여전히 돌연변이의 특성을 나타내는 이유를 설명합니다. 다양한 세포 변화를 추적 할 수있는 유전자의 능력은 세포가 태아에서 성인에 이르기까지 유기체의 삶을 통해 어떻게 변화 하는지를 조사하고자하는 과학자들에게 이상적입니다.

과학자들은 어떻게 로사 26 기 쥐를 만들 수 있습니까?

로사 26 궤적에 유전자를 삽입하는 것은 표적 배아 줄기 세포를 사용하거나 크리스퍼/카스 9 시스템을 통해 수행 할 수 있습니다. 종종 네오 마이신을 포함하는 플록화 된 서열은 전사 및 후속 발현을 방지하기 위해 관심있는 유전자 앞에 위치합니다.

조건식의 경우,과학자들은 크레 록스 시스템을 사용한다. 조건부”플록화 된”마우스를 크롬화 된 재조합 효소를 발현하는 마우스와 교차하면 플록화 된 시퀀스 내에서 발견 된 유전자 서열이 삭제됩니다. 이 유전자는 유전자에 의해 생성 된 유전자에 의해 생성 될 수 있습니다. 이 크레아 딜레이터가 정지 기능을 제거 할 때까지 세포는 유전자를 발현하지 않고 정상적으로 행동합니다. 이 조건부 노크 인 방법을 사용하여 과학자들은 유전자가 다른 세포 또는 조직에서 발현되는시기를 제어 할 수 있습니다.

전형적으로,삽입된 카세트는 또한 유전자의 발현을 추적하는 리포터를 포함한다. 이 궤적의 많은 연구에서,과학자들은 엑손 또는 인트론에 통합하지 않는 한,그것은 표현을 생성하지 않기 때문에 기자로 락츠,박테리아 유전자를 사용했다. 자신을 표현하도록 허용 될 때,락츠는 모든 성인 조직에서 갈락토시다 제 발현을 촉진합니다.

크리스퍼/카스 9 기술의 향상된 사용은 또한 과학자들이 로사 26 사이트에서 유전자를 노크하는 데 이 방법을 사용할 수 있게 한다. 접합체를 주입하는 오래된 수단에 비해 크리스퍼는 더 높은 성공률을 보였습니다. 이전 방법은 살아있는 설립자 돌연변이 체의 10%에서 20%만 산출 한 반면 크리스퍼 생산 마우스는 생존력과 돌연변이로 50%의 성공률을 보였습니다.유전자 서열과 함께 결합한다. 이 과정을 통해 서열에서 유전자를 식별할 수 있으며,카스 9 단백질은 활동을 위해 트라크르나를 필요로 합니다.마우스 접합체에 타겟팅 벡터를 주입한다. 이 경우,유전자좌는 유전자좌의 특정 부위(예:로사 26)로 안내하고,이중 가닥이 깨지게 한다. 세포는 상 동성 지향 수리라는 과정을 통해 깨진 유전자를 복구 할 것입니다. 표적화 벡터 내의 관심 유전자는 로사 26 궤적에 통합되거나 삽입된다. 따라서 생쥐를 스크리닝하는 시간이 단축됩니다.

결과의 정확성을 확인하기 위해 서던 블롯 분석은 무작위 삽입에 대한 주요 스크리닝 수단을 제공합니다. 타겟팅 벡터는 크리스퍼 프로젝트의 32%에서 무작위 삽입을 생성 할 수 있기 때문에 서던 블롯 분석은 완성 된 제품을 테스트하는 데 중요한 도구가됩니다. 이 테스트를 통해 유전자의 위치 및 복사 번호가 정확성을 위해 확인됩니다.

연구에 로사 26 마우스를 사용하는 이유는 무엇입니까?

로사 26 마우스 연구용

마우스 유전모델을 사용하는 연구기관의 경우,결과의 신뢰성은 동물의 출처를 결정하는 데 중요한 역할을 한다. 결과 검증,오랜 성공 기록 및 수많은 만족 한 고객은 로사 26 마우스 및 기타 유전 서비스에 대한 품질 소스의 징후입니다.

바이오사이토젠은 로사 26 노크-인 및 조건부 노크-인 마우스를 생성하여 연구자들이 과학적 문제를 해결하는 데 도움을 줄 수 있다. 우리는 서비스 제공 업체 및 혁신입니다. 우리의 독점적 인 전자 공학 방법은 정확성을 희생하지 않고 더 빠른 결과를 위해 인사 속도를 높입니다. 어떤 핵심 시설 또는 공급 업체는이 장점이 없습니다.

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